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淺談食用菌液體培養技術(shù)的發(fā)展和應用
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     食用菌液體培養又稱(chēng)深層發(fā)酵或液體發(fā)酵。主要原理是在發(fā)酵罐或三角瓶中加入液體培養基,通入無(wú)菌空氣以增加培養基中溶氧含量,提供食用菌菌絲體呼吸代謝所 需要的氧氣,同時(shí)加以攪拌或振蕩,并控制適宜的外界條件等,使菌體在液體深處繁殖發(fā)育,獲得大量的菌絲體或代謝產(chǎn)物。目前,國外的食用菌深層發(fā)酵研究主要 是獲取風(fēng)味物質(zhì)(食品)和特殊代謝產(chǎn)物(醫藥、飼料),國內研究則集中在液體菌種的生產(chǎn)及提取代謝產(chǎn)物等[1,2]。本文對食用菌液體培養技術(shù)的發(fā)展、液 體培養技術(shù)生產(chǎn)食用菌菌種的優(yōu)勢及其在食品、生物醫藥等行業(yè)中的應用和發(fā)展前景等加以介紹。
   1食用菌液體培養技術(shù)發(fā)展狀況
   1.1食用菌液體培養法的起源與發(fā)展
   食用菌的液體發(fā)酵是在抗生素發(fā)酵技術(shù)的基礎上發(fā)展起來(lái)的,1947年美國的漢姆非特(Humfeld H)首先提出了液體培養法生產(chǎn)蘑菇菌絲體。1948~1954年他們選出了適合液體培養的蘑菇菌株。1953年美國人布洛克博士(S.S.Block)用 廢柑汁深層培養出了野生蘑菇。1958年沙克斯(Szuecs J)第1個(gè)在發(fā)酵罐內培養出羊肚菌菌絲球。日本的杉森恒武等于1977年用1%的有機酸和0.5%的酵母膏組成液體培養基,取得大量香菇菌絲體。從此,食 用菌的培植開(kāi)始從農業(yè)生產(chǎn)跨入了工業(yè)生產(chǎn)的領(lǐng)域。
   1.2我國食用菌液體培養技術(shù)的發(fā)展
   我國是在1958年開(kāi)始研究蘑菇、側耳深層發(fā)酵。到1963年,已經(jīng)能進(jìn)行羊肚菌的工業(yè)化商品生產(chǎn)。從此,食用菌產(chǎn)品的獲得開(kāi)始由簡(jiǎn)單的農業(yè)種植而轉入工 業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)。20世紀60年代末期,我國已能大規模采用深層發(fā)酵法生產(chǎn)食用菌,主要研究單位有四川抗生素研究所、三明真菌研究所、中國醫藥科學(xué)院藥物研究 所、上海新型發(fā)酵廠(chǎng)等。研究主要集中在藥用菌的生產(chǎn),如靈芝、蜜環(huán)菌、銀耳芽孢等菌類(lèi)。20世紀70年代開(kāi)始研究香菇、冬蟲(chóng)夏草、猴頭、黑木耳等食用菌的 液體發(fā)酵。20世紀90年代,由于發(fā)現食用菌多糖有抗癌活性,使得一些具有生理活性物質(zhì)的菌類(lèi)(如云芝、灰樹(shù)花等)引起了更多的關(guān)注,針對這些菌類(lèi)的深層 發(fā)酵培養技術(shù)的研究也得到長(cháng)足發(fā)展。
   目前對食用菌液體發(fā)酵的報道很多,而在利用液體菌種直接用來(lái)生產(chǎn)食用菌子實(shí)體方面,國內只有少量的報道。如甘肅省科學(xué)院生物研究所的李玉珍等研究了側耳液 體菌種在不同培養料上的性狀表現,重慶師專(zhuān)的朱健勇等進(jìn)行了液體發(fā)酵菌種生產(chǎn)金針菇子實(shí)體的試驗,得到了菌絲生活力強、接種面大、發(fā)菌速度快的一些結果。 但是這些試驗一般也都停留在實(shí)驗室階段,沒(méi)能在生產(chǎn)上推廣應用。究其主要原因,是因為液體深層發(fā)酵的設備投入大、風(fēng)險高,一般個(gè)體生產(chǎn)戶(hù)不愿投入;接種技 術(shù)不過(guò)關(guān),在接種過(guò)程中往往容易產(chǎn)生污染;菌種不易保存,發(fā)酵以后必須馬上投入使用等,因而造成了液體菌種生產(chǎn)子實(shí)體技術(shù)一直未能推廣應用。
   2液體培養技術(shù)制備食用菌菌種的優(yōu)勢
   2.1生產(chǎn)周期短
   制備液體菌種一般只要5~7d,周期短,速度快。而培養1瓶固體栽培菌種需要30d左右,僅發(fā)菌時(shí)間就比固體菌種減少了1/2以上。此外,用液體菌種作為 母種或原種來(lái)擴大培養原種或栽培種時(shí),也要比采用固體菌種快得多。一般液體種要比固體種提前成熟10~20d。因為液體菌種有流動(dòng)性,各個(gè)菌絲球和菌絲片 斷可以流散在不同的部位萌芽,發(fā)育點(diǎn)多,內外上下一起長(cháng),6~12h菌絲萌發(fā),15~20d可長(cháng)滿(mǎn)栽培袋,大多數品種10多天就可出菇。

2.2菌齡一致
   由于固體菌種是靠接種塊上的菌絲體蔓延長(cháng)成的,這樣不僅培養菌種的速度慢,而且處在菌種瓶(袋)上部和下部的菌絲體菌齡差異較大,一般要差20~30d, 往往當下部菌絲體剛長(cháng)到瓶(袋)底時(shí),處在接種處的上部菌絲體就接近老化。而液體菌種則生長(cháng)發(fā)育均勻一致,菌齡整齊,液體發(fā)酵5~7d時(shí)的菌絲體正值旺盛 生長(cháng)期,接種后萌發(fā)快,菌絲活力強,發(fā)育健壯。用其拌料栽培,其菌絲生長(cháng)速度較一致,現蕾及出菇時(shí)間一致,便于管理、采收與加工。
   2.3接種簡(jiǎn)便
   流質(zhì)狀態(tài)的液體菌種還便于接種工作的機械化、自動(dòng)化,有利于工作效率的提高,更適合食用菌的工廠(chǎng)化、標準化生產(chǎn)。并且液體菌種萌發(fā)速度超過(guò)了雜菌滋長(cháng)速度,雜菌幾乎沒(méi)有滋生的機會(huì ),因此克服了雜菌污染的技術(shù)難題,保證了產(chǎn)品質(zhì)量。
   2.4降低成本
   采用三角瓶或發(fā)酵罐生產(chǎn)液體菌種,產(chǎn)量高,原料便宜,成本不到固體菌種的1/3。同時(shí),由于其生產(chǎn)周期短,不使用菌種瓶,可省去裝瓶、挑棄污染瓶、接種、挖瓶等繁雜工藝,節省了勞力、電耗和空間。
   2.5效益顯著(zhù)
   液體菌種的生產(chǎn)廠(chǎng)房面積小,生產(chǎn)效率高,易進(jìn)行自動(dòng)化控制,產(chǎn)品質(zhì)量穩定,產(chǎn)品易于提取和精制,使得質(zhì)量與產(chǎn)量明顯高于傳統的生產(chǎn)方式,經(jīng)濟效益顯著(zhù)。
   2.6液體菌種是食用菌產(chǎn)業(yè)化的必由之路
   實(shí)踐證明,液體菌種代替固體菌種在生產(chǎn)上是可行的,能擴大生產(chǎn)規模、提高生產(chǎn)效率、降低生產(chǎn)成本、縮短生產(chǎn)周期,為食用菌的工業(yè)化、集約化生產(chǎn)奠定了基 礎。由于液體菌種具有不便運輸、保存等限制因素,可利用液體菌種作原種,擴繁成固體栽培種,可明顯縮短制種周期。這樣既克服液體菌種的缺點(diǎn),又能發(fā)揮其優(yōu) 勢,雖然這樣不能充分體現液體菌種的先進(jìn)性,但這一途徑比較適合我國食用菌生產(chǎn)的國情?,F在一些大型的食用菌生產(chǎn)加工企業(yè),正成為液體菌種推廣的示范基 地。例如山東九發(fā)的雙孢蘑菇工業(yè)化生產(chǎn)線(xiàn),北京天吉龍食用菌公司的白靈菇生產(chǎn)線(xiàn),上海浦東天廚菇業(yè)有限公司的“天廚一號”純白金針菇生產(chǎn)工廠(chǎng)。這些現代化 的食用菌工廠(chǎng),既是液體菌種的使用者,同時(shí)又起到示范推廣的作用,必將會(huì )在生產(chǎn)實(shí)踐中推動(dòng)液體菌種生產(chǎn)使用技術(shù)的不斷發(fā)展。
   3食用菌液體培養技術(shù)的應用與前景
   3.1食品工業(yè)上的應用
   液體發(fā)酵食用菌菌絲體的營(yíng)養成分,無(wú)論是蛋白質(zhì)、氨基酸,還是維生素的含量,都類(lèi)似于子實(shí)體。目前食用菌液態(tài)發(fā)酵正在大量研究開(kāi)發(fā)中,由于用工業(yè)化液體發(fā) 酵來(lái)生產(chǎn)食用菌蛋白質(zhì),要比飼養家禽或家畜來(lái)獲取蛋白質(zhì)的時(shí)間短、效率高、成本低。因此,食用菌的深層發(fā)酵在食品工業(yè)方面將有很大的發(fā)展前途,將有望成為 21世紀人類(lèi)所需的主要蛋白質(zhì)的來(lái)源之一。
   3.2生物醫藥產(chǎn)業(yè)上的應用
   食用菌在深層培養過(guò)程中會(huì )產(chǎn)生多糖、生物堿、萜類(lèi)化合物、甾醇、酶、核酸、維生素、具抗生素作用的多種化合物以及植物激素等多種生理活性物質(zhì),這些物質(zhì)分 別具有對心血管、肝臟、神經(jīng)系統、腎等人體器官的防病治病作用以及抗癌、消炎、抗衰老、抗菌、提高免疫力等功效[6,7]。目前,許多液體發(fā)酵的食用菌菌 絲體可用于制藥,對于那些在人工栽培條件下不易形成子實(shí)體或者其菌絲體與子實(shí)體含相類(lèi)似有效成分的覃菌,可以利用發(fā)酵產(chǎn)物代替子實(shí)體?,F在,我國市場(chǎng)上供 應的食用真菌藥物,如蜜環(huán)片、靈芝菌片、寧心寶膠囊等均已采用液體發(fā)酵菌絲體制造。
   3.3其他行業(yè)上應用
   液體發(fā)酵形成的菌絲體以及含有多種代謝產(chǎn)物的發(fā)酵液,是上等的飼料,一般作為蛋白質(zhì)原料加入到飼料中,具有易吸收、轉化效率高、經(jīng)濟效益好等特點(diǎn),將是動(dòng)物飼料中蛋白質(zhì)的重要來(lái)源。

4結論
   隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,尤其是微生物學(xué)、蕈菌學(xué)、發(fā)酵工藝學(xué)和工程學(xué)的相互滲透和交叉,特別是發(fā)酵產(chǎn)物分離技術(shù)的發(fā)展,食用菌液體發(fā)酵技術(shù)在食品和醫藥等行 業(yè)上的應用將更廣泛、前景更寬闊。食用菌液體培養技術(shù)在制備食用菌菌種上的突出優(yōu)勢使其將成為我國食用菌生產(chǎn)工廠(chǎng)化、規?;谋赜芍?,并將促使我國的食 用菌發(fā)展得到質(zhì)的飛躍。


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